Difference between revisions of "简易凝胶法（Easygel）"
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他们的专利测试方法不需要依赖琼脂和昂贵设备，而且是测试水中大肠菌群和大肠杆菌最简单、最有效的方法。 | 他们的专利测试方法不需要依赖琼脂和昂贵设备，而且是测试水中大肠菌群和大肠杆菌最简单、最有效的方法。 | ||
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正确使用的情况下，简易凝胶法和膜滤法的效果都非常好。简易凝胶（Easygel®）以液体培养基形式提供，该液体培养基含有胶凝剂，当将其倾入含有钙离子层的培养皿中，就会使培养基固化，使其与标准预混合琼脂皿相似。可以用测试物料划过或拭抺凝胶培养皿，或者在倒入培养基之前，可以加入小测试样本（通常为1-5毫升）。膜滤由不含胶凝剂的液体培养基组成，与已过滤含水测试样本（样本容量通常较大）的微孔膜过滤器一起使用，使小培养皿中的无菌垫饱和。两种方法都使用非常相似的配方和成分（胶凝剂除外）。（如果熟悉膜滤法，即以琼脂为培养基，并在培养皿形成固体层作为膜过滤器基础的过滤方法，Coliscan®也可以以这种方式制备。除非收到定制请求，滤膜目前不以此方式提供。） | 正确使用的情况下，简易凝胶法和膜滤法的效果都非常好。简易凝胶（Easygel®）以液体培养基形式提供，该液体培养基含有胶凝剂，当将其倾入含有钙离子层的培养皿中，就会使培养基固化，使其与标准预混合琼脂皿相似。可以用测试物料划过或拭抺凝胶培养皿，或者在倒入培养基之前，可以加入小测试样本（通常为1-5毫升）。膜滤由不含胶凝剂的液体培养基组成，与已过滤含水测试样本（样本容量通常较大）的微孔膜过滤器一起使用，使小培养皿中的无菌垫饱和。两种方法都使用非常相似的配方和成分（胶凝剂除外）。（如果熟悉膜滤法，即以琼脂为培养基，并在培养皿形成固体层作为膜过滤器基础的过滤方法，Coliscan®也可以以这种方式制备。除非收到定制请求，滤膜目前不以此方式提供。） | ||
简易凝胶（Easygel®）设计旨在样本每毫升的目标生物数量相当高时使用，因此将1-5毫升样本直接加入到培养基中时，每个培养皿形成的菌落数目将足以做到准确计数。 | 简易凝胶（Easygel®）设计旨在样本每毫升的目标生物数量相当高时使用，因此将1-5毫升样本直接加入到培养基中时，每个培养皿形成的菌落数目将足以做到准确计数。 | ||
Revision as of 08:18, 22 October 2017
简易凝胶是琼脂的替代产品，使用和运输都更方便。 简易凝胶法是果胶凝胶法，是一个分为两部分的无菌测试，由液体培养基和用特殊配方预处理的培养皿组成。当液体培养基倒入预处理的培养皿中时，两者混合使培养基凝胶化。 完全凝胶化约需40分钟，之后培养皿就可以使用了。简易凝胶有几种配方，包括普通的总生菌数（标准菌落总数）配方和已获专利的Coliscan配方。
Coliscan培养基采用显色化学品和养料这种已获专利的组合，以不同颜色标记大肠菌群和大肠杆菌，以便识别和分离。这意味着可以将水或其他物料的测试样本添加到培养基中，大肠杆菌菌落将呈粉色到品红色，而大肠杆菌菌落将呈紫蓝色。其他细菌类型的菌落通常呈无色。使用Coliscan培养基有两种方法：Coliscan Easygel（简易凝胶法）和Coliscan-MF（膜滤法）。
简易凝胶由微生物实验室（Micrology Labaroties）研发，该公司专门研究易于使用、准确的水测试和微生物应用方式。
他们的专利测试方法不需要依赖琼脂和昂贵设备，而且是测试水中大肠菌群和大肠杆菌最简单、最有效的方法。
适用条件
正确使用的情况下，简易凝胶法和膜滤法的效果都非常好。简易凝胶（Easygel®）以液体培养基形式提供，该液体培养基含有胶凝剂，当将其倾入含有钙离子层的培养皿中，就会使培养基固化，使其与标准预混合琼脂皿相似。可以用测试物料划过或拭抺凝胶培养皿，或者在倒入培养基之前，可以加入小测试样本（通常为1-5毫升）。膜滤由不含胶凝剂的液体培养基组成，与已过滤含水测试样本（样本容量通常较大）的微孔膜过滤器一起使用，使小培养皿中的无菌垫饱和。两种方法都使用非常相似的配方和成分（胶凝剂除外）。（如果熟悉膜滤法，即以琼脂为培养基，并在培养皿形成固体层作为膜过滤器基础的过滤方法，Coliscan®也可以以这种方式制备。除非收到定制请求，滤膜目前不以此方式提供。） 简易凝胶（Easygel®）设计旨在样本每毫升的目标生物数量相当高时使用，因此将1-5毫升样本直接加入到培养基中时，每个培养皿形成的菌落数目将足以做到准确计数。 当测试样本的目标生物数量非常低，并且有必要验证目标生物是否真的不存在或计数非常低时，会使用膜滤法；而当测试物料中目标生物数量相对较大时，简易凝胶法极为适用于确定其计数。
制作，使用和维护
使用指示
用无菌容器采集水样，并将其运回测试地点，或直接从水源提取测量水样，并直接采入Coliscan简易凝胶瓶中。如果水样在加入培养皿前保存超过一（1）小时，或将已加入样本中的任何Coliscan简易凝胶瓶运输超过十（10）分钟，应放冰上或放进冰箱，直至将其加入培养皿。
培养皿应有适当的样本信息标识。用永久马克笔或蜡笔都可以。
- 将样本容器中的水样无菌转移到Coliscan简易凝胶瓶中（请参阅下表的种菌数量粗略指引）。旋动瓶子使种菌均匀，然后将培养基／种菌混合物倒入正确标记的培养皿中。盖上培养皿。轻轻旋转注有液体的培养皿，直到整个培养皿都被液体覆盖（但要小心，不要溅在侧面或盖子上）。
- 培养皿可以正面朝上，直接放进水平培养箱，或在仍是液体时，放置到房间内温暖的地方。固化过程需时约40分钟。
在35°C（95°F）下培养24小时，或在室温下培养48小时。（见有关培养的注释）
- 检查培养皿
- 点算Coliscan培养皿上的所有紫色菌落（忽略任何淡蓝色、蓝绿色或白色菌落），并以每毫升水的大肠杆菌含量报告结果。注意：要报告每100毫升水的大肠杆菌含量，首先得找出相乘的基础数。要做到这一点：首先，将100除以您用于样本的毫升数。然后，将您的培养皿中的计数乘以＃1的结果。例如3毫升样本的话，就是100 / 3 = 33.3。因此，4个大肠杆菌菌落乘以33.3，即相当于每100ml水中大肠杆菌含量为133.2。
点算Coliscan培养皿上的所有粉色和紫色菌落（忽略任何淡蓝色、蓝绿色或白色菌落），并以每毫升水的大肠菌群含量报告结果。
在一般垃圾处理之前，请执行以下操作之一：
- 将培养皿和Coliscan瓶放进压力锅中，以15磅压力煮15分钟。这是最好的方法。
- 将培养皿和Coliscan瓶放进耐烘箱高温袋中，密封并在烘箱中以300°F加热45分钟。
- 将培养皿和Coliscan瓶子放进大平底锅中，以水盖过，煮45分钟。
- 将培养皿和Coliscan瓶放进压力锅中，以15磅压力煮15分钟。这是最好的方法。
在每个培养皿的培养基表面上，加入5毫升（约1茶匙）漂白剂。请至少等待5分钟。放入防水袋中，丢进垃圾桶。
结果解释
此测试方法利用相沿成习、广泛接受的大肠菌群和大肠杆菌识别标准，适当的使用就会得到准确的结果。因此，如果您根据使用Coliscan简易凝胶的结果，怀疑水源受到严重污染，您应该联系当地的卫生部门，并要求他们协助进行官方水质评估。
非粪大肠菌群在大自然中广泛分布，被认为是天然存在的土壤生物体，也存在于温血动物和人类的肠道。粪大肠菌群通常是只在温血动物和人类肠道中发现的大肠菌群。因此，粪大肠菌群污染是某种形式的粪便污染的结果。污染来源可能是动物或人类。
费用
取决于试剂盒的内容以及使用哪种类型的凝胶，简易凝胶试剂盒的费用介于14至55美元之间。
实地经验
对不同水测试方法（包括简易凝胶）的研究：Comparison and verification of four field-based microbiological tests: H2S test, Easygel®, Colilert®, PetrifilmTM.
- 使用Coliscan简易凝胶分析危地马拉农村高地饮用水污染物浓度：Drinking Water Field Analyses for the Detection and Enumeration of Coliform Bacteria in Rural Guatemalan Highlands
操作指南、视频和链接
- 简报演示：Current Issues and Approaches to Microbial Testing of Water: Applicability and Use of Current Tests in the Developing World
- The History of the Development of the Easygel ® and Coliscan ® Methods
- 简报演示的PDF版：E. coli Monitoring – Effective Techniques and Test Kits for Volunteers
- 附图像的Easygel使用指示：Serial Dilution Instructions
